Der 5. Spieltag | 
| Di, 24.08.2021, 19.00 Uhr | TSV 1860 München |   | 3:0 (1:0) |   | FC Viktoria Köln | 
| Di, 24.08.2021, 19.00 Uhr | SV Waldhof Mannheim |   | 5:0 (2:0) |   | SV Meppen | 
| Di, 24.08.2021, 19.00 Uhr | Hallescher FC |   | 1:0 (1:0) |   | 1. FC Kaiserslautern | 
| Di, 24.08.2021, 19.00 Uhr | FSV Zwickau |   | 1:1 (1:0) |   | FC Viktoria 1889 Berlin | 
| Di, 24.08.2021, 19.00 Uhr | SC Verl |   | 0:3 (0:0) |   | Eintracht Braunschweig | 
| Mi, 25.08.2021, 19.00 Uhr | VfL Osnabrück |   | 2:1 (1:0) |   | Borussia Dortmund II | 
| Mi, 25.08.2021, 19.00 Uhr | MSV Duisburg |   | 0:2 (0:0) |   | SV Wehen Wiesbaden | 
| Mi, 25.08.2021, 19.00 Uhr | TSV Havelse |   | annull. |   | Türkgücü München | 
| Mi, 25.08.2021, 19.00 Uhr | 1. FC Saarbrücken |   | 2:1 (0:1) |   | 1. FC Magdeburg | 
| Mi, 25.08.2021, 19.00 Uhr | SC Freiburg II |   | 1:0 (0:0) |   | Würzburger Kickers |